但是,由于样本中内源性Ig的影响,应用二抗往往会产生较多的非特异性信号。这一现象在组织或细胞培养用血清和一抗种属来源相同时格外严重,严重时会造成靶标信号湮灭。为了去除组织中内源性Ig的干扰,获取动物组织前进行心脏灌注往往是必要的。但是灌注过程对操作者的实验技术和试剂的清洁性具有较高的要求,不适当的灌流往往会造成组织内栓塞形成而降低灌流效果,有时甚至会造成样本中蛋白质降解导致实验失败。使用二抗同时意味着增加了孵育次数,这使得实验的时间被延长。 随着时间的推移,越来越多的人们意识到:直接标记一抗可以解决以上问题。直标一抗可以直接结合靶标而不受内源抗体的影响,毫无疑问,这降低了背景信号干扰,提升了对样本前期准备阶段的容错率(包括清洗和灌流等)。此外,直标一抗在应用于流式细胞分选时,大大降低了二抗非特异性吸附导致细胞错分的几率。直标一抗孵育后,简单清洗即可直接进行下一步检测,节省实验步骤与宝贵的实验时间,并降低失误的几率。因此,越来越多的实验室研究人员(特别是国外高端实验室),已经开始逐步将传统的间接免疫方法置换为一抗直标方法。使用直标一抗发表的各类文章已获得学术界的广泛接受。 直标系列产品活动集锦
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