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干货 | 如何正确选择细胞培养“板瓶皿”的使用?

作者:无锡耐思生命科技股份有限公司 2024-01-24T00:00 (访问量:30925)

培养细胞时,何时使用培养瓶,何时使用孔板培养,取决于实验目的和需要。一般情况下,原代细胞培养和常规传代培养使用培养瓶,可获得大量实验用细胞
                

                  细胞培养瓶 

由高品质聚苯乙烯(PS)材料,以超精密模具及全自动化生产工艺生产,产品应用于实验室细胞培养,优异的光学性质便于显微观察,表面经过TC处理,细胞贴壁效果更佳。
                                                                                                                   

TIPS:什么是TC处理?

TC处理表示该器皿经过表面的改性处理,适合贴壁细胞的培养。而悬浮生长的细胞,就不一定需要这样经过特殊处理过的器皿。但经过表面的改性处理后的细胞培养皿等一般也适合悬浮细胞的培养。

大部分动物细胞需要贴附在一个固相界面上才能生长。而只有亲水的固相界面,细胞才能贴附。

最早的细胞培养器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是亲水的,不经过特殊的处理,普通的细胞就可以贴附生长。而聚苯乙烯透光性能好,具有较好的强度和易塑性,并且没有毒性,成为一次性细胞培养皿和细胞培养板等一次性细胞培养耗材的首选材料,然而聚苯乙烯表面是疏水的,所以需要经过表面的改性处理,增强细胞吸附与蛋白结合的能力,变成亲水后才能适用于细胞培养。
                                                                                                                   

首先,根据期望获得的细胞产量来选择,培养瓶是通过表面积来命名的,例如T25、T75、T175,数字就是表面积,25就是25平方厘米,如此类推;
其次,根据实验操作熟练程度来选择,不管是换液、传代、还是收获细胞,培养皿的操作比较方便,但因为其开口很大,所以容易污染,如果你是新手,不建议直接用培养皿养细胞。

                                                       
                                                      细胞培养皿 

最后,如果选择培养瓶培养,还应该尽量选择有斜肩设计、带透气孔瓶盖的型号。
前者可以避免培养瓶平放后,过多的培养基接触瓶盖造成污染,后者可以保持内外的二氧化碳浓度一致。
如果瓶盖不透气,那在放进培养箱时,应拧松一圈,以便内外气体能顺利交换。

2 、以细胞为载体或对象的实验使用细胞培养板较好,如药敏试验、MTT(96孔培养板)、免疫组化(6孔培养板)等。


                                                           细胞培养板 


选择好合适的孔板后,在培养阶段,有2点注意事项:

  • 多孔板会带板盖,但其密封性不好,在培养箱内会造成边缘的孔位蒸发效率过高,进而影响细胞生长速率。可以在盖上板盖后在缝隙处贴一圈封口膜。或者舍弃边缘孔位,并采用添加培养基来代替。
                                                                                                               

    NEST EDGE细胞培养板

    EDGE细胞培养板周围具有沟槽设计,通过改变原有96孔板的结构,在最外侧孔的外侧设计了不同宽度及厚度的槽形结构,因此达到最大程度消除边缘效应的目的,同时又保证了细胞培养的最佳状态。提高了培养板的温度稳定性和均衡的湿度环境,从而减 少或消除了边缘效应,保证了细胞生长的均一性。

                                     
                                                                                                               

  • 当细胞种入孔内以后,不应该再进行过多的震动,例如晃动、抖动培养板,而应该轻缓的放入培养箱中。

  • 如果培养箱由多人共用,还应该考虑频繁开关箱门、拿放孔板造成的震动,这些不利因素都应该尽量减少。

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