HSV-2潜伏感染与复发

HSV-2（生殖器疱疹病毒）感染后，病毒会沿着神经到人体神经根部长期潜伏。藏身期间，病毒通过特定基因保持休眠，药物也难以清除。当人免疫力下降、压力大或生病时，病毒会被激活，顺着神经重新返回皮肤，导致水疱复发（图1）。首次感染后约90%的人一年内会复发，平均每年发作5-9次。免疫力越差（如艾滋病患者），复发越频繁。病毒休眠时不产生新病毒，因此常规药物无法彻底消灭它。

图1.HSV病毒的感染形式

HSV-2豚鼠复发模型的评估

评估HSV-2豚鼠复发模型通常是单个水泡或红色病变，在不同的时间段内可作为累积评分来衡量（图2）。随着时间的推移，病变的发生率逐渐降低，因此典型的观察期为从急性期恢复后的7-8周，即15-64天或71天。类似地，可以通过获得观察动物复发性疾病期间阴道拭子来量化对复发性病毒脱落的影响。与人类一样，存在或不存在生殖器病变的情况下都可能发生脱落。由于反复脱落是最重要的传播来源，所以这是评估疫苗和其他干预措施的关键终点。推断一种有效的疫苗或早期抗病毒干预措施将限制病毒在早期感染期间在DRG中的传播和复制，这种减少将影响随后的复发性疾病和复发性病毒的传播。

图2.显示复发性病变的时间进程以平均复发性病变评分(line)表示，反复脱落的过程以PCR检测HSV阳性的阴道拭子百分比表示

使用豚鼠作为HSV生殖器疾病动物的优势

在众多的HSV生殖器疾病动物模型中，豚鼠与人类疾病最为相似，在评价药物、生物制剂和疫苗方面比其他小动物模型具有许多优势。如自发性复发、无症状脱落及潜伏感染特征与人类HSV-2感染高度相似，可同时评估急性病变、病毒复制、潜伏载量及免疫反应等。

HSV中和抗体检测服务流程

迪福润丝生物中和抗体检测是鉴定疫苗、抗体药物等有效性的黄金标准，迪福润丝生物自有的CRO服务平台「DIFF+」可针对HSV疫苗及药物进行评价，提供基于细胞病变效应法（Cytopathic Effect, CPE）的RSV中和抗体检测服务（图3），该检测方法能够与传统的PRNT检测方法建立线性相关性，灵敏度高、检测迅速（24h即可出结果），实验方法的特异性、重复性均能满足中和实验的要求，适用于高通量样本的检测。

图3. HSV中和抗体检测流程图

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除中和抗体检测外，迪福润丝生物还可以提供豚鼠动物模型评价，进一步验证疫苗或药物在动物体内的抗病毒效果。

HSV-2豚鼠模型服务

迪福润丝生物采用豚鼠进行HSV-2动物攻毒可产生明显的体重变化（图4）与病变（图5），根据实际症状，设置了相应的评分标准，具体的案例模型评分如下（图6）：

· 1分：生殖器红肿并产生疱疹，

· 2分：多个疱疹融合成片，

· 3分：疱疹溃烂流脓，

· 4分：疱疹溃烂流脓发黑+大小便失禁，

· 5分：疱疹溃烂流脓发黑+大小便失禁+四肢无力或瘫痪，

图4. HSV-2豚鼠攻毒体重变化（不同剂量攻毒）

图5. HSV-2豚鼠攻毒实际症状变化

图6. HSV-2豚鼠攻毒模型案例评分

HSV-2豚鼠攻毒毒株信息

迪福润丝生物正在构建HSV-2豚鼠复发模型，预计今年6月完成。该模型通过免疫抑制、物理刺激精准模拟病毒潜伏-复发周期，可评估病变评分与病毒脱落动态，为抗病毒药物及疫苗研发提供关键支持。相关科研服务即将开放，敬请期待！

参考文献：

1.邹晖.CTCF在HSV-2潜伏复发中结合位点的鉴定与验证[D].华南理工大学. 2020.005105.

2.David I. Bernstein. Use of the Guinea pig model of genital herpes to evaluate vaccines and antivirals: Review. Antiviral Research. Volume 180,2020,104821, ISSN 0166-3542.

3.Nisha Dhanushkodi,  Swayam Prakash1, Ruchi Srivastava1, et al. A Prime/Pull RR2/CXCL11Therapeutic Vaccine that Bolsters the Number and Function of Dorsal Root Ganglia Tissue-Resident HSV-Specific CD8+TRM Cells Protects Latently Infected Guinea Pigs from Recurrent Genital Herpes. Laboratory of Cellular and Molecular Immunology, Gavin Herbert Eye Institute, University of California Irvine, School of Medicine, lrvine, CA,92697.